液相色譜柱的性能直接關系到分離分析的準確性與適用性

　　液相色譜儀由高壓液體泵分離系統(tǒng)、檢測器及液相色譜柱(含柱溫控制系統(tǒng))等三部分組成。其中液相色譜柱是液相色譜工作的關鍵，液相色譜柱的性能直接關系到分離分析的準確性與適用性。
 

　　液相色譜柱的分類方法很多，可按鍵合相類型、用途(分析型與制備型)、基質(zhì)種類等進行分類。
 

　　1 、硅膠基質(zhì)柱(4大類)
 

　　目前，分析型液相色譜柱多為硅膠基質(zhì)柱，細分為：
 

　　高純硅膠柱：以高純度硅烷化硅膠(Silica)為填料，應用范圍較廣，但只能在PH2.0-7.5，小于60度的條件下使用。又由于強極性硅羥基(Si-OH)的次級保留效應較強，所以應用受到局限，已被鍵合相柱所取代。
 

　　反相硅膠柱：是以硅烷化硅膠為基質(zhì)，表面鍵合弱極性官能團的固定相。目前多用C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(phenyl，苯基)等。用于分離大多數(shù)有機化合物，應用范圍廣。
 

　　正相硅膠柱：是以硅烷化硅膠為基質(zhì)，表面鍵合極性官能團的固定相。目前較多的為：NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL(二羥基，也常做HILIC單獨分類列出，多用于分離有機酸、蛋白質(zhì)等)。多用于分離光學異構體和反相柱子不能分離的極性比較大的物質(zhì)。
 

　　離子交換柱：是以硅烷化硅膠為基質(zhì)，以磺化交聯(lián)鍵合強陽/陰離子基團(磺酸鹽/季銨堿)的固定相，又分為強酸性、強堿性、弱酸性、弱堿性等不同規(guī)格。用于分離解離性較強的有機鹽類化合物。(注意：不要同離子色譜混淆，離子色譜主要是分離無機鹽類化合物或某些帶點離子。)
 

　　2、聚合物基質(zhì)柱
 

　　聚合物基質(zhì)柱是指采用聚苯乙烯—二乙烯基苯、聚甲基丙烯酸脂、多孔性微球蛋白等聚合物凝膠作為主要填料的一類色譜柱。其相對于硅膠柱具有更強的疏水性及更寬泛的pH范圍(1.0～14.0)，但柱效較低，目前主要應用于凝膠滲透色譜(GPC)、凝膠過濾色譜(GFC)及分子排阻色譜(MEC)。主要用于分離蛋白質(zhì)類等大分子化合物。
 

　　3、其他無機物填料柱
 

　　這類色譜柱于特殊用途，主要有石墨化碳、氧化鋁(Al2O3)、氧化鋯(ZrO2)等填料。不需要進行表面改性，其自身表面即可對各類化合物有強保留。可在任意pH(氧化鋁除外，不能大于12.0)及高溫度(可達100℃)下使用。其中，石墨化碳填料柱能分離多種化合物，主要用于分離幾何異構體;氧化鋁柱剛性強，柱床穩(wěn)定，可分離多種化合物且多用于制備色譜;氧化鋯柱較氧化鋁柱有更強的pH適用范圍及能耐受更高的溫度，但其應用尚待進一步研究。